组织芯片免疫组化染色全流程解析
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在生物医学研究领域,组织芯片免疫组化染色是一个不可或缺的强大工具。通过高效、精准的实验流程,它帮助研究人员和临床医生更深入地探究疾病机制。
今天,我们将带您快速了解这一重要技术的实验步骤和应用价值。
烤片:将封蜡的组织芯片置于65°C烘箱中,烤片1-2小时,确保切片牢固附着在载玻片上。
脱蜡水化:使用二甲苯进行脱蜡,随后通过梯度乙醇逐步水化,做好后续实验准备。
抗原修复:利用热修复技术恢复抗原的天然构型,提高抗体与目标蛋白的结合能力。
画疏水圈:在组织边缘用疏水笔画圈,避免试剂外溢,确保染色精准
封闭步骤:采用过氧化物酶抑制剂和血清封闭试剂,减少非特异性结合,优化染色效果。一抗和二抗孵育
一抗孵育:通常孵育过夜,以确保抗体与目标蛋白充分结合。
二抗孵育:时间为10至30分钟,根据一抗来源选择合适的二抗。
显色:使用DAB显色底物或荧光染料,标记目标蛋白的位置,呈现结果。
苏木精染核和封片:苏木精对细胞核染色,使其清晰可见;接着完成脱水、透明化,并封片以保存。完成显色后染核和封片。
注意事项:
确保试剂覆盖均匀。
严格控制烤片时间,避免切片脱片。
在操作过程中排除气泡,防止染色不均问题。

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2025年2月26日 14:01
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