多重免疫组化一些问题答疑

 

　　关于多重免疫组化一些问题的回答小编整理了一篇文章~

 

　　B细胞、T细胞、DC细胞常用maker能推荐下吗?

 

　　T细胞：CD3、CD4、CD8、FoxP3(再细化还有：GranzymeB、PD-1、TIM-3、CD45)

 

　　B细胞：CD19 ;

 

　　DC细胞：CD8α、CD11b

 

　　TSA技术原理中有抗体洗脱的步骤，但是在你们的试剂盒步骤说明中咋没有?

 

　　试剂盒步骤中的抗原修复过程即是抗体洗脱过程

 

　　在指标与染料的搭配以及染色顺序上，是有什么规律嘛?

 

　　并没有一个特别的线性关系哈，和蛋白的种类、表达量以及修复条件都有关系，所以会多因素考虑，多多地尝试，预实验蛮重要。

 

　　若是我能提供抗体给你们做服务的话，需要的抗体量是多少?

 

　　需要的抗体量需要根据样本数来，但是哈一般来讲，50-100ul的抗体已经够完成预实验+正式实验了。

 

　　多色样本的寄送有啥条件限制不?

 

　　正常的石蜡切片跟组织芯片还是蛮稳定，只要防震盒常温运输即可，冰冻切片的话，得要干冰低温运输。

 

　　实验用时真的一天能做完吗?

 

　　相比较一般普通的组织荧光实验，我们一抗的孵育时间只要室温30分钟，二抗和信号放大步骤只要孵育10分钟，能很好的节约时间，五色左右能够在一天内做完。

 

 

　　多色用的一二抗各是什么种属?

 

　　多色的优势在于一二抗种属无需特别要求，一抗根据样本种属选择就可以了，二抗根据一抗选择就可以啦，多个抗体组合，种属不会有影响。

 

　　染料的选择会影响后染色不，有共定位的话怎么办

 

　　共定位的情况，我们可以通过单一通道观察来更加好的检测各指标的分布情况，染料不会对染色有啥影响，串色的情况得需要预实验做充足，包括抗体稀释比例，染料与放大液比例，修复条件的确定。

 

　　抗体修复液每1轮修复都得要更换不?

 

　　是，每一轮都要根据抗体选择相应的修复液

 

　　所有操作要避光吗?

 

　　不要的哈，在常规环境下操作就可以，染料的荧光强度很高

 

　　以上就是小编整理的关于多重免疫组化的一些问题的答疑，希望对您有帮助~